Phân tích kiểu hình miễn dịch là một thí nghiệm điển hình được thực hiện trong các lĩnh vực nghiên cứu liên quan đến tế bào để chẩn đoán các bệnh khác nhau (bệnh tự miễn, bệnh suy giảm miễn dịch, chẩn đoán khối u, cầm máu, bệnh dị ứng, và nhiều bệnh khác) và bệnh lý.Nó cũng được sử dụng để kiểm tra chất lượng tế bào trong các nghiên cứu bệnh tế bào khác nhau.Phương pháp đo tế bào dòng chảy và kính hiển vi huỳnh quang là các phương pháp phân tích thông thường trong các viện nghiên cứu bệnh tế bào được sử dụng để xác định kiểu hình miễn dịch.Nhưng các phương pháp phân tích này chỉ có thể cung cấp hình ảnh hoặc chuỗi dữ liệu, có thể không đáp ứng các yêu cầu phê duyệt nghiêm ngặt của cơ quan quản lý.
M Dominici el, Liệu pháp tế bào (2006) Vol.8, số 4, 315-317
Xác định kiểu hình miễn dịch của AdMSCs
Kiểu miễn dịch của AdMSCs được xác định bởi Countstar FL, AdMSCs được ủ với các kháng thể khác nhau tương ứng (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 và HLADR).Một quy trình ứng dụng màu tín hiệu được tạo ra bằng cách thiết lập kênh Green thành huỳnh quang PE của hình ảnh, cộng với trường sáng.Phân đoạn tham chiếu hình ảnh trường sáng được áp dụng như một mặt nạ để lấy mẫu tín hiệu huỳnh quang PE.Kết quả của CD105 đã được hiển thị (Hình 1).
Hình 1 Xác định kiểu hình miễn dịch của AdMSCs.A. Trường sáng và hình ảnh huỳnh quang của AdMSCs;B. Phát hiện CD Marker của AdMSC bằng Countstar FL
Kiểm soát chất lượng của MSC - xác nhận kết quả cho từng ô đơn
Hình 2 A: Kết quả Countstar FL được hiển thị trong FCS express 5plus, đo tỷ lệ phần trăm dương của CD105 và các ô đơn trong bảng tổng quan.B: Gating được điều chỉnh về phía bên phải, hình ảnh của bảng ô đơn cho thấy những ô có biểu hiện cao của CD105.C: Gating được điều chỉnh về phía bên trái, hình ảnh của bảng các ô đơn cho thấy những ô có biểu hiện CD105 thấp.
Các thay đổi kiểu hình trong quá trình vận chuyển
Hình 3. A: Phân tích định lượng tỷ lệ phần trăm dương tính của CD105 trong các mẫu khác nhau bằng phần mềm FCS express 5 plus.B: Hình ảnh chất lượng cao cung cấp thêm thông tin hình thái học.C: Kết quả được xác thực bằng hình thu nhỏ của từng ô, công cụ phần mềm FCS chia các ô thành các ô khác nhau
