Áljẹ́rà: Awọn sẹẹli sẹẹli mesenchymal jẹ ipin ti awọn sẹẹli stem pluripotent ti o le ya sọtọ lati mesoderm.Pẹlu isọdọtun isọdọtun ti ara ẹni ati awọn abuda iyatọ itọsọna pupọ, wọn ni agbara giga fun ọpọlọpọ awọn itọju ailera ni oogun.Mesenchymal yio ẹyin ni a oto ajẹsara phenotype ati agbara ilana.Nitorinaa, awọn sẹẹli sẹẹli mesenchymal ti wa ni lilo pupọ tẹlẹ ninu awọn gbigbe sẹẹli sẹẹli, imọ-ẹrọ ti ara, ati gbigbe ara eniyan.Ati Ni ikọja awọn ohun elo wọnyi, wọn lo bi ohun elo pipe ni imọ-ẹrọ ti ara bi awọn sẹẹli seeder ni lẹsẹsẹ ti ipilẹ ati awọn idanwo iwadii ile-iwosan.Titi di isisiyi, ko si ọna ti o gba jakejado ati boṣewa fun iṣakoso didara ti awọn sẹẹli sẹẹli mesenchymal.Countstar Rigel le ṣe atẹle ifọkansi, ṣiṣeeṣe, ati awọn abuda phenotype (ati awọn iyipada wọn) lakoko iṣelọpọ ati iyatọ ti awọn sẹẹli yio.Countstar Rigel tun ni anfani ni gbigba alaye imọ-jinlẹ afikun, ti a pese nipasẹ aaye didan ayeraye ati awọn gbigbasilẹ aworan ti o da lori fluorescence lakoko gbogbo ilana ti ibojuwo didara sẹẹli.Countstar Rigel nfunni ni iyara, fafa, ati ọna igbẹkẹle fun iṣakoso didara ti awọn sẹẹli yio.
Awon nkan ise nkan ati awon ona lati se nkan:
Awọn sẹẹli sẹẹli mesenchymal ti o ni Adipose (AdMSCs) jẹ ẹbun nipasẹ Ọjọgbọn Nianmin Qi, ojutu abawọn AO/PI (Shanghai RuiYu, CF002).Alatako: CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLADR (BD Company).
Awọn AdMSC jẹ aṣa ni 37℃, 5% CO2 incubator ọriniinitutu.Dije pẹlu trypsin ṣaaju lilo.
Ilana idoti asami CD ni a tẹle bi itọnisọna antibody.
Wiwa asami CD pẹlu Countstar Rigel:
1. Ilana ohun elo ifihan-awọ ti a ṣẹda nipasẹ siseto ikanni PE si aworan PE fluorescence.
2. Awọn aaye 3 ni a gba lati iyẹwu kọọkan.
3. Lẹhin ti aworan ati itupalẹ akọkọ ti pari, ipilẹ ẹnu-ọna (bode log) eto fun rere ati gbigbe odi ti ṣeto nipasẹ sọfitiwia FCS.
Iṣakoso didara ti yio cell
Awọn wọnyi Figure (olusin 1) fihan ilana ti yio cell ailera .
Nọmba 1: Ilana fun itọju ailera sẹẹli
Awọn abajade:
Ṣiṣe ipinnu ifọkansi, ṣiṣeeṣe, iwọn ila opin, ati akojọpọ awọn AdMSCs.
Awọn ṣiṣeeṣe ti AdMSCs jẹ ipinnu nipasẹ AO/PI, Ilana ohun elo meji-awọ ni a ṣẹda nipasẹ eto ikanni Green ati ikanni Pupa si aworan AO ati PI fluorescence, pẹlu aaye didan.Awọn aworan apẹẹrẹ ti han ni Nọmba 2.
Nọmba 2. Awọn aworan ti ṣaaju gbigbe ati lẹhin gbigbe ti AdMSCs.A. Ṣaaju gbigbe;aworan aṣoju ti han.B. Lẹhin gbigbe;aworan aṣoju ti han.
Iṣeṣeṣe ti awọn AdMSC ti yipada ni pataki lẹhin gbigbe nigba akawe pẹlu ṣaaju gbigbe.Iṣeṣe ṣaaju gbigbe jẹ 92%, ṣugbọn o dinku si 71% lẹhin gbigbe.Abajade naa han ni aworan 3.
Nọmba 3. Awọn abajade ṣiṣeeṣe ti AdMSCs (Ṣaaju gbigbe ati lẹhin gbigbe)
Iwọn ila opin ati apapọ ni a tun pinnu nipasẹ Countstar Rigel.Iwọn ila opin ti awọn AdMSC ti yipada ni pataki lẹhin gbigbe nigba ti a bawe pẹlu ṣaaju gbigbe.Iwọn ila opin ṣaaju gbigbe jẹ 19µm, ṣugbọn o pọ si 21µm lẹhin gbigbe.Ijọpọ ti ṣaaju gbigbe jẹ 20%, ṣugbọn o pọ si 25% lẹhin gbigbe.Lati awọn aworan ti o ya nipasẹ Countstar Rigel, phenotype ti AdMSC ti yipada ni pataki lẹhin gbigbe.Awọn abajade ti han ni aworan 4.
Nọmba 4: Iwọn ila opin ati awọn abajade akojọpọ.A: Awọn aworan aṣoju ti AdMSCs, phenotype ti AdMSCs ti yipada ni pataki lẹhin gbigbe.B: Akopọ ṣaaju gbigbe jẹ 20%, ṣugbọn o pọ si 25% lẹhin gbigbe.C: Iwọn ila opin ṣaaju gbigbe jẹ 19µm, ṣugbọn o pọ si 21µm lẹhin gbigbe.
Ṣe ipinnu imunophenotype ti AdMSC nipasẹ Countstar Rigel
Ajẹsara-ajẹsara ti AdMSCs ni ipinnu nipasẹ Countstar Rigel, AdMSC ti wa pẹlu oriṣiriṣi apakokoro lẹsẹsẹ (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR).Ilana ohun elo awọ-ifihan ti ṣẹda nipasẹ tito ikanni Green kan si aworan PE fluorescence, pẹlu aaye didan.Iyatọ itọkasi aworan aaye didan ni a lo bi iboju-boju lati ṣapejuwe ami ifihan fluorescence PE.Awọn abajade CD105 ti han (Figure 5).
Nọmba 5: Awọn abajade CD105 ti AdMSCs jẹ ipinnu nipasẹ Countstar Rigel.A: Ayẹwo pipo ti ipin rere ti CD105 ni awọn apẹẹrẹ oriṣiriṣi nipasẹ FCS express 5 plus software.B: Awọn aworan ti o ni agbara ti o ga julọ n pese alaye imọ-ara afikun.C: Awọn abajade ti a fọwọsi nipasẹ awọn eekanna atanpako ti gbogbo sẹẹli kan, awọn irinṣẹ sọfitiwia FCS pin awọn sẹẹli si awọn ẹgbẹ oriṣiriṣi ni ibamu si ikosile amuaradagba oriṣiriṣi wọn.
Awọn abajade ajẹsara miiran ti han ni Ọpọtọ 6
Ṣe nọmba 6: A: Aworan aṣoju ti awọn ASC pẹlu ẹda-ara ti o ni apẹrẹ spindle.Ti ya nipasẹ OLYMPUS maikirosikopu.Imugo atilẹba, (10x).B: Iyatọ Adipogenic ti ASC jẹ ẹri nipasẹ Ruthenium Red idoti ti o nfihan awọn agbegbe ti erupe ile.Ti ya nipasẹ OLYMPUS maikirosikopu.Imugo atilẹba (10x).C: Countstar FL kikọ ti ASCs.
Akopọ:
Countstar FL le ṣe atẹle ifọkansi, ṣiṣeeṣe, ati awọn abuda phenotype (ati awọn iyipada wọn) lakoko iṣelọpọ ati iyatọ ti awọn sẹẹli yio.FCS n pese iṣẹ naa lati ṣe atunyẹwo gbogbo sẹẹli ifihan agbara, jẹrisi data nipasẹ aworan naa.Olumulo naa tun le ni igboya lati ṣe awọn idanwo atẹle ti o da lori awọn abajade Countstar Rigel.Countstar Rigel nfunni ni iyara, fafa, ati ọna igbẹkẹle fun iṣakoso didara ti awọn sẹẹli yio.
